人IGG的elisa試劑盒，是一種利用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中IGG水平的科研試劑盒。上海信帆生物科技有限公司專(zhuān)業(yè)生物試劑人的IGG elisa檢測(cè)試劑盒，質(zhì)量可靠，價(jià)格低廉。我們所生物試劑人IGG(免疫球蛋白G)elisa試劑盒，具有度高于市場(chǎng)同類(lèi)產(chǎn)品，性價(jià)比在市場(chǎng)上具有很強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)，如果有質(zhì)量問(wèn)題或者測(cè)試結(jié)果有問(wèn)題，免費(fèi)包退換。歡迎廣大師生朋友訂購(gòu)，，號(hào)。

以下給大家介紹一下有關(guān)于人IGG elisa試劑盒的一些研究報(bào)道，希望對(duì)大家的研究有所幫助：

定量檢測(cè)科研血清IgG蛋白質(zhì)芯片的研制及應(yīng)用研究

 隨著人類(lèi)基因組測(cè)序工作的完成,對(duì)基因表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)的研究已成熱點(diǎn)。為揭示眾多蛋白質(zhì)的作用和相互關(guān)系,從而真正解釋基因功能,以蛋白質(zhì)組學(xué)為核心的后基因組研究已成為必然趨勢(shì)。蛋白芯片(protein chip)是按預(yù)先設(shè)計(jì)的方式將抗原或抗體固定在玻片上,形成蛋白質(zhì)的微陣列,即蛋白質(zhì)芯片,帶有特殊標(biāo)記的蛋白質(zhì)分子(抗體或抗原)與之特異性結(jié)合,通過(guò)對(duì)標(biāo)記物的檢測(cè)來(lái)實(shí)現(xiàn)抗原抗體的高通量互檢。該技術(shù)所需蛋白質(zhì)的量極少,檢測(cè)反應(yīng)相對(duì)較快,具有通量化,穩(wěn)定性較好,靈敏度較高。

目前在國(guó)內(nèi)外這方面的研究都才剛剛起步。蛋白質(zhì)芯片以蛋白質(zhì)代替DNA作為檢測(cè)目的物,比基因芯片更接近生命活動(dòng)的物質(zhì)層面,因而有著比基因芯片更加直接的應(yīng)用前景。同時(shí)由于蛋白質(zhì)芯片可利用微量生理或生物采樣即可同時(shí)檢測(cè)不同的蛋白質(zhì)分子和蛋白質(zhì)分子之間的相互作用,獲得各種條件下蛋白質(zhì)組的變化.進(jìn)而得以對(duì)基因的表達(dá)情況及基因功能進(jìn)行深入研究。高通量定量檢測(cè)的蛋白質(zhì)芯片是研究檢測(cè)和實(shí)驗(yàn)研究*工具,本研究為研制玻片為載體的高通量蛋白質(zhì)芯片,以科研血清IgG為研究模型,建立定量檢測(cè)蛋白質(zhì)芯片技術(shù)平臺(tái),并應(yīng)用于科研血清IgG的檢測(cè),其檢測(cè)結(jié)果與傳統(tǒng)的ELISA方法比較。

研究?jī)?nèi)容分兩個(gè)部分,1.介質(zhì)表面修飾對(duì)蛋白質(zhì)芯片固定率和反應(yīng)性的影響。2.定量檢測(cè)科研血清IgG蛋白質(zhì)芯片研制及應(yīng)用研究。 *部分:對(duì)zui常用的三種玻璃表面化學(xué)修飾方法對(duì)蛋白質(zhì)芯片質(zhì)量的影響進(jìn)行評(píng)價(jià)。為研制評(píng)價(jià)蛋白質(zhì)固定效率的芯片,用Cy3標(biāo)記的山羊抗人IgG抗體樣品,用含40%甘油的PBS溶液稀釋成為0.5 mg/L,0.75 mg/L,1 mgm,1.25 mg/L,1.5 mg╱L,1.75 mg╱L,2.0 mg╱L等濃度。取戊二醛、poly-L-lysine,GTPS環(huán)氧基修飾的玻片各一塊,按上述濃度點(diǎn)樣,每一濃度點(diǎn)1列3點(diǎn),形成3×7的陣列,點(diǎn)樣過(guò)程的溫度為室溫(25℃),濕度為30%～40%。點(diǎn)樣完成后,將玻片放入濕盒中進(jìn)行溫浴4h,晾干,用Genepix4000B掃描儀獲取熒光圖象。取出玻片,用PBST(PBS中含0.1%Tween-20)清洗3遍,每次5 min,再用PBS清洗5 min,晾干,再用Genepix4000B掃描儀獲取熒光圖象。 為研制評(píng)價(jià)蛋白質(zhì)反應(yīng)性的芯片,用倍比稀釋法,連續(xù)科研血清lgG樣品分別至3.125mg╱L,6.25mg/L,12.5mg/L,25mg╱L,50mg/L,100mg╱L等濃度,在戊二醛、poly-L-lysine修飾的玻片點(diǎn)樣,每一濃度點(diǎn)1列3點(diǎn),形成3×7的陣列,點(diǎn)樣過(guò)程的溫度為室溫(25℃),濕度為30%～40%。點(diǎn)樣完成后,將玻片放入濕盒中進(jìn)行:37℃溫浴4h,晾干,用1%BSA(質(zhì)量體積比)作封閉,將玻片放入封閉液反應(yīng)1h,降低非特異性吸附,用PBST(PBS中含0.1%Tween-20)清洗3遍,每次5min,再用PBS清洗5 min,將戊二醛修飾的破片用0.2%的硼化鈉還原Schiff堿形成更穩(wěn)定的單鍵結(jié)構(gòu)。取Cy3 goat-anti-human IgG(0.5 mg╱L)1.6μl到芯片陣列的表面,用蓋玻片壓勻,放入濕盒中進(jìn)行37℃溫浴1h,取出用PBST(PBS中含0.1%Tweon-20)清洗3遍,每次5 min,再用PBS清洗5 min,晾干,掃描儀獲取熒光圖象。三種修飾方法的芯片均可使蛋白質(zhì)保持較好的固定效率和反應(yīng)活性,由共價(jià)鍵偶聯(lián)的戊二醛修飾玻片不僅有更高的反應(yīng)活性,而且圖象佳,但背景略高。預(yù)點(diǎn)樣10個(gè)拷貝點(diǎn)后,各蛋白質(zhì)樣品的熒光測(cè)量值趨于穩(wěn)定,可正式點(diǎn)樣。點(diǎn)樣后的固定時(shí)間以24-48h為宜。時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短均會(huì)導(dǎo)致熒光測(cè)量值偏低。使用1%BSA封閉緩沖液的封閉效果。*的抗原一抗體特異性結(jié)合反應(yīng)溫度為37 0C、時(shí)間為2h,選擇1mg/ml作為*的點(diǎn)樣濃度。

綜合評(píng)價(jià),戊二醛修飾的蛋白質(zhì)芯片優(yōu)于多聚賴氨酸修飾芯片,醛基修飾的蛋白質(zhì)芯片用于科研和研究蛋白質(zhì)檢測(cè)是可行的,這為蛋白質(zhì)芯片的應(yīng)用開(kāi)發(fā)提供選擇的依據(jù)但應(yīng)當(dāng)探討如何降低醛基修飾芯片的背景這對(duì)于提高蛋白質(zhì)芯片的敏感性和信噪比,具有重要意義,此方面技術(shù)有待進(jìn)一步探索。 第二部分:建立定量檢測(cè)科研血清IgG蛋白質(zhì)芯片的技術(shù)平臺(tái)。為研制定量檢測(cè)科研血清IgG蛋白質(zhì)芯片,選擇醛基修飾的城片為載體,蛋白質(zhì)樣品溶解于20%甘油的PBS,由機(jī)械手將濃度為0.5 mg/ml人IgG單克隆抗體點(diǎn)樣在玻片上,科研血清白蛋白為陰性對(duì)照,以1%的BSA為封閉液對(duì)蛋白質(zhì)芯片進(jìn)行封閉,并經(jīng)相應(yīng)處理,構(gòu)建用于定量檢測(cè)科研血清lgG蛋白質(zhì)芯片。以IgG標(biāo)準(zhǔn)品為檢測(cè)對(duì)象,建立蛋白質(zhì)芯片方法和ELISA方法的標(biāo)準(zhǔn)曲線,分別用蛋白質(zhì)芯片方法和ELISA方法檢測(cè)10例科研血清IgG。將純化的羊抗人IgG 0.5mg/ml 30%甘油/PBS,點(diǎn)樣在經(jīng)硝酸纖維素修飾的片基上,以科研血清白蛋白為陰性對(duì)照,用1%BSA封閉,制備定量檢測(cè)科研血清IgG的蛋白質(zhì)芯片;同時(shí)用ELISA檢測(cè)科研血清IgG。SPSS 10.0軟件分析蛋白質(zhì)芯片和ELISA的試驗(yàn)結(jié)果,采用單因素方差分析兩組間相關(guān)性。結(jié)果顯示蛋白質(zhì)芯片和ELISA校準(zhǔn)曲線的R~2值分別是0.996和0.994。兩種方法檢測(cè)的10例科研血清IgG含量,其檢測(cè)限均在1.56μg╱100μL。用單因素方差分析結(jié)果顯示f=0.188,P=0.670＞0.05,表明兩組間差異無(wú)顯著性意義,具有很好的一致性。本研究以科研血清IgG為模型,比較蛋白質(zhì)芯片與ELISA在定量分析中的效果,顯示出二者的高度相關(guān)性。抗體芯片的基礎(chǔ)在于包被于芯片基質(zhì)上的抗體的有效數(shù)量和活性,作為蛋白質(zhì)芯片技術(shù)中應(yīng)用前景的抗體芯片技術(shù),在定量分析中有一定的優(yōu)勢(shì)。